蛋白质组学样品准备及寄送指南

一、蛋白质组学样品准备的一般原则

1.确保样品状态良好，符合预期的表型或分子指标。

2.带手套、口罩、头套进行操作，避免角蛋白污染。

3.保证取材后的操作在冰上进行，并尽量操作迅速。

4.依后续实验需求，做好分装，避免蛋白反复冻融。

5.取材后，液氮速冻，- 80 ℃ 冰箱保存，干冰寄送。

二、蛋白质组学服务项目对样品量的要求

1.银染或考染胶条：需条带肉眼清晰可见。

2.细胞：蛋白质组学项目需1×10⁶或体积>30 μL；磷酸化蛋白质组学项目需1×10⁷。

3.动物组织：蛋白质组学项目需鲜重100 mg；磷酸化蛋白质组学项目需500 mg。

4.植物组织：蛋白质组学项目需鲜重200 mg；磷酸化蛋白质组学项目需1 g。

 备注：对于蛋白得率较低的样品，建议在条件允许的情况下，适当提高样品送样量；特殊样品，请联系公司技术人员协商送样量。

三、常见类型样品的准备流程

1.胶条样品：将蛋白条带用干净的刀片切下，并切割为1 mm³的小块，装入进口EP管中及时送样，送样时需加冰袋维持低温。

2.蛋白溶液样品：最好测定蛋白浓度后，干冰寄送液氮速冻的蛋白溶液（需指明缓冲液成分和浓度）；或将蛋白通过TCA法或丙酮法沉淀，晾干后，干冰或冰袋寄送。

3.细胞、细菌、真菌样品：用预冷的PBS缓冲液清洗三次，去除培养基残留成分，清洗结束后，离心将上清弃去，液氮速冻后，-80 ℃保存，或干冰寄送。

4.动物组织样品：取材后冰上操作，迅速将组织剪成长宽高分别为0.5 cm的小块，用预冷PBS清洗三遍，去除残留血液，称重后，液氮速冻，-80 ℃保存，或干冰寄送。

5.植物组织样品：新鲜取材后，用预冷的PBS将材料表面污物去除，称重后，液氮速冻，-80 ℃保存，或干冰寄送。

6.培养基上清液：培养细胞至合适密度，用无血清培养基清洗三遍后，加入无血清培养基继续培养合适时间，收集培养上清，离心去除细胞后，使用0.22 μm的滤膜过滤，液氮速冻后，-80 ℃保存，或干冰寄送。

7.血液样品：血液样品一定避免溶血，要求采集血液时同时制备为血清或者血浆样品，建议使用相应的采血管，之后通过离心的方式获得血清或血浆，按需求分装后，液氮速冻，-80 ℃保存，或干冰寄送。

8.IP样品：关于IP样品制备与注意事项，可向我司索取“IP-MS实验指南”。