单细胞转录组测序
单细胞测序(single cell sequencing,SCS)是从单个细胞水平上对DNA/mRNA进行扩增与测序的一项新技术。相较于传统测序技术,单细胞测序不仅可以解析同一组织内细胞间的异质性,还能对微量细胞进行测序。单细胞测序技术自2009年问世后,迅速发展。2013年,单细胞测序技术被《Science》 列为年度最值得关注的六大领域榜首,被《Nature Methods》评为年度技术。
单细胞转录组测序(Single cell RNA sequencing , ScRNA-seq)是在单细胞水平对转录组进行测序,通过数据分析实现细胞群体分类以及细胞群体间基因表达差异分析,让解析单个细胞的行为、机制及其与机体的关系成为了现实。
应用领域
肿瘤细胞异质性研究,免疫细胞分化研究,胚胎发育、器官发育、干细胞分化研究,神经系统发育研究,用药指导、疾病分析、生物标记物等。
技术路线:
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结果展示:
送样建议:
样本类型 | 送样量要求 | 备注 | |
新鲜样本 | 新鲜血液 | 抗凝管保存。人≥4ml;鼠1~2ml。 | 4℃寄送,72h内送达 |
肝、肾、肺等新鲜组织 | 保存于组织保存液中。 取样量:肿瘤、器官类0.1-1g;软骨类≥1g硬骨类≥10g;人血管类≥1g;鼠血管≥6cm;其他类型咨询技术推广专员。 | ||
悬液样本 | 单细胞悬液 | 细胞量≥1×106cells;细胞活率>80%;细胞直径介于7-40μ;细胞团及碎片杂质<5%;若有红细胞需裂红处理;悬液中不含Ca²+和Mg²+等影响酶活性的物质等。 | 4℃保存;2h内送达 |
冻存样本 | 冻存细胞 | 冻存密度3-6×106cells/mL(管),每管1mL;复苏后活率>75%。 | 单细胞抽核实验;梯度降温盒-80℃保存24h后干冰寄送或液氮保存。 |
冻存组织 | 一般组织0.2g-0.5g/管,流式分选0.6-1g/管。 | ||
注意: 1、样本量足够建议首次寄送时同一样本有2-3管重复,以备份。 2、客户需要组织保存液或冻存液,可自行购买或提前联系实验室寄送。 3、4℃寄送:寄送时装有样本的储存管不能和冰袋直接接触,需用泡沫包裹,保证4℃左右的低温环境。 |